有机氯

实验一、土壤中六六六和滴滴涕的测定

（气相色谱法）

一、适用范围

（一）本范围适用于土壤中六六六、滴滴涕的分析。

（二）本法采用丙酮-正己烷提取，用带电子捕获监测器的气相测谱仪测定。

（三）本方法的最低检测浓度为0.00005～0.00487mg/kg。

二、试剂和材料

（一）载气

载气N2，纯度99.999%。

（二）配置标准样品和试样预处理时采用的试剂和材料

使用的试剂系分析纯，有机溶剂经重蒸，浓缩20倍用气谱测定无干扰峰。

1、色谱标准样品：α-六六六、β-六六六、γ-六六六、δ-六六六、p,p′-DDE、o,p′-DDT、p,p′-DDD、p,p′-DDT,含量98%～99%，色谱纯。

2、丙酮（CH3COCH3）。

3、正己烷

4.浓硫酸（H2SO4）：密度为1.84g/mL。

5、无水硫酸钠（Na2SO4）：在300℃烘箱中烘烤4h，备用。

6、硅藻土：试剂级。

三、仪器

（一）主要仪器：带电子捕获检测器的气相测谱仪。

（二）控制载气的压力表及流量计。

（三）进样器：全玻璃系统进样器。

（四）记录仪：与仪器相匹配的记录仪。

（五）检测器：

1、类型：电子捕获检测器。

2、器件的特征：可采用63Ni放射源或高温3H放射源。

3、检测器极化电压：可采用直流电源或脉冲电源。

（六）色谱柱：

色谱柱的类型：美国Varian-VF-9161色谱柱

（七）试样预处理时使用的仪器：

1、样品瓶：适宜的玻璃磨口瓶。

2、蒸发浓缩器。

3、水浴锅。

4、振荡器。

5、氮吹仪

6、玻璃器皿：300mL分液漏斗，300mI具塞锥形瓶，100mL量筒，250mL平底烧瓶，25、50、100mL容量瓶。

7、微量注射器：5μL、10μL。

四、样品预处理

（一）样品性质

1、样品名称：土壤样品。

2、样品状态：固体。

3、样品的稳定性：在土壤样品中六六六、滴滴涕化学性质稳定。

（二）样品的采集及贮存方法

1、样品的采集

土壤，在田间根据不同的分析目的多点采集，风干去杂物，研碎过60目筛，充分混匀，取500g装入样品瓶备用。

2、样品的保存

土壤样品采集后应尽快分析，如暂不分析应保存在-18℃冷冻箱中。

（三）试样的预处理

1、萃取

准确称取20 g 土壤样品放在250 mL 三角烧瓶中，加正己烷-丙酮（1:1）（V/V）30mL，塞紧瓶塞浸泡过夜，置于振荡器中提取90min，提取液用加入2g无水硫酸钠的定量滤纸过滤，用250 mL三角烧瓶收集过滤液，用正己烷—丙酮（1:1）（V/V）洗涤土壤残渣3～4 次，并将洗涤液并入三角烧瓶中， 用旋转蒸发器（温度28℃左右）浓缩至2～3 mL左右。

2、净化

（1）硫净化：在三角瓶中加1～2块铜片，振摇1min除去硫。

（2）弗罗里硅土柱净化：在弗罗里硅土柱加入1 cm 高无水Na2SO4，用10mL丙酮润湿层析柱，再用20mL正己烷活化层析柱，当上液面下降至硫酸钠层顶端时，将浓缩液转移至弗罗里硅土柱中，并用正己烷洗涤浓缩瓶3 次，洗涤液并入弗罗里硅土柱中，收集流出液与250 mL 三角烧瓶中,当上液面再次下降至硫酸钠层顶端时，加20mL正己烷—丙酮（95﹕5）（V/V）淋洗液淋洗层析柱，淋洗液也并入同一个三角烧瓶中，然后旋转蒸发（温度28℃ 左右）浓缩至2～3 mL左右，转移至10mL离心管中，在氮气流浓缩至小于1 mL ，加入内标后定容至1 mL ，供气相色谱分析。

3、样品分析

采用GC-ECD分析样品，进样量：1μL，分流比10:1。

五、色谱测定操作步骤

（一）仪器的调整

柱温程序：柱温150℃，恒温1min以后；以10℃/min由 150℃升至190℃；以2℃/min由 190℃升至210℃；以1℃/min由 210℃升至220℃；以20℃/min由 220℃升至260℃，保持3min。

（二）校准

1、定量方法

外标法。

2、标准曲线

将有机氯农药标准使用液配制浓度依次为10、20、30、40、50μg/L 的系列标准溶液,加入内标使用液,使内标浓度为20μg/L，上机测定，并绘制标准曲线。

3、校准数据的表示

试样中组分按式(1)校准：

xiAiEiAE (1)

式中：Xi——试样中组分i的含量，mg/kg；

Ei——标准溶液中组分i的含量，mg/kg；

Ai——试样中组分i的峰高，cm(或峰面积cm2)；

AE——标准溶液中组分i的峰高，cm(或峰面积cm2)。

（三）进样试验

1、进样

（1）进样方式：注射进样。

（2）进样量：一次进样量1μL。

（3）操作：用清洁注射器在待测样品中抽吸几次，排除所有气泡后，抽取所需进样体积，迅速注射入色谱仪中，并立即拔出注射器。

（四）色谱图的考察

1、标准色谱图

六六六、滴滴涕气相色谱图

1一α-六六六；2一γ—六六六；3一β-六六六；4—δ-六六六；5一p，p’-DDE；

6一o，p’-DDT；7一p，p’—DDD；8一p，p’—DDT

2、定性分析

组分的出峰次序，α-六六六.γ—六六六.β-六六六.δ-六六六.p，p’-DDE.o，p’-DDT.p，p’—DDD.p，p’—DDT.

3、定量分析

（１）色谱峰的测量

以峰的起点和终点的联线作为峰底，以峰高极大值对时间轴作垂线，对应的时间即为保留时间，此线从峰顶至峰底问的线段即为峰高。

（２）计算

hiWisVhisViGRi (2)

式中：Ri——样品中i组分农药的含量，mg/kg；

hi——样品中i组分农药的峰高，cm(或峰面积cm2)；

Wis——标样中i组分农药的绝对量，ng；

V——G(g)样品定容体积，mL；

his——标样中i组分农药的峰高，cm(或峰面积cm2)；

Vi——样品的进样量，uL；

G——样品的重量，g。

六、结果的表示

（一）定性结果

根据标准色谱图各组分的保留时间来确定被测试样中出现的组分数目和组分名称。

（二）定量结果

含量的表示方法：计算出的各组分的含量，以mg/kg表示。